百合SRAP-PCR反应体系的建立与优化  

陈丽静1,2 , 曹珊1 , 王玉坤1 , 刘烜晨1 , 张丽1 , 明军3 , 陶承光2 , 李天来1
1.沈阳农业大学辽宁省生物技术重点实验室, 设施园艺省部共建教育部重点实验室, 沈阳, 110866
2.辽宁省农业科学院, 沈阳, 110161
3.中国农科院蔬菜花卉研究所, 北京, 100081
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2011 年, 第 9卷, 第 24 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0024
收稿日期: 2011年01月11日    接受日期: 2011年02月28日    发表日期: 2011年03月02日
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陈丽静等, 2011, 百合SRAP-PCR反应体系的建立与优化, 分子植物育种 Vol.9 No.24 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0024)

摘 要

建立适宜百合DNA的SRAP-PCR扩增体系,为百合基因图谱的构建和分子标记打下基础。以百合为试验材料,试验在确定了模板浓度和引物浓度后,采用二因素交叉试验方法,对影响百合SRAP反应体系的5种因素(模板DNA、引物、Mg2+浓度、dNTPs、Taq聚合酶用量)进行优化筛选,建立了适合百合的扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应体系,即在15μL PCR反应体系中含有1.5 μL 10×PCR Buffer、80 ng模板DNA、0.11 μmol﹒L-1引物、1.67 mmol﹒L-1 Mg2+、0.267 mmol﹒L-1 dNTPs、1.0 U Taq聚合酶,PCR产物变性时用10 μL变性剂。

关键词
百合;SRAP;二因素交叉试验设计;体系优化
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《分子植物育种》网络版
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