刺槐SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选  

袁存权1 , 李允菲1 , 杨妮娜1 , 戴丽1 , 胡瑞阳1 , 孙鹏1 , 李云1 , 荀守华2
1.林木育种国家工程实验室, 林木、花卉遗传育种教育部重点实验室, 国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室, 北京林业大学生物科学与技术学院, 北京, 100083
2.山东省林业科学研究院, 济南, 250014
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2011 年, 第 9卷, 第 25 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0025
收稿日期: 2011年01月06日    接受日期: 2011年02月28日    发表日期: 2011年03月04日
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袁存权等, 2011, 刺槐SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选, 分子植物育种 Vol.9 No.25 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0025)

摘 要

利用L16(45)正交试验设计结合单因素试验对刺槐SRAP-PCR反应体系中的主要成分进行优化,建立了一套适用于刺槐的SRAP-PCR反应体系。优化的25 µL SRAP-PCR反应体系中各主要组分的最适含量为:Mg2+ 2.5 mmo1/L,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,primer 0.3 µmol/L,模板DNA 30 ng。用8份刺槐不同材料DNA验证优化体系,结果显示,反应体系的稳定性和可靠性较好。利用优化的SRAP-PCR反应体系,从169对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰,重复性好以及多态性丰富的引物35对。这一优化体系的建立将为利用SRAP标记技术进行刺槐种质资源遗传多样性分析、指纹图谱构建以及刺槐分子标记辅助育种研究奠定基础。

关键词
刺槐;SRAP-PCR;体系优化;引物筛选
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《分子植物育种》网络版
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