烟草优质品种花全长cDNA文库的构建和质量鉴定  

曾建斌1 , 陈华1 , 陈顺辉2 , 张冲1 , 蔡铁城1 , 庄伟建1
1.福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室, 福州, 350002
2.福建省烟草专卖局烟草农业科学研究所, 福州, 350003
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2011 年, 第 9卷, 第 40 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0040
收稿日期: 2010年11月18日    接受日期: 2011年02月28日    发表日期: 2011年04月08日
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曾建斌等, 2011, 烟草优质品种花全长cDNA文库的构建和质量鉴定, 分子植物育种 Vol.9 No.40 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0040)

摘 要

以优质烤烟品种翠碧一号花为材料,CTAB法提取总RNA,按经修改的CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction kit的方法,成功构建了花全长cDNA文库。经鉴定,初级文库库容为4.05×106个克隆,重组率达到95%,插入片段集中在1 000bp~2 500 bp之间,平均长度约为1 400 bp,经扩增后的文库滴度为6.75×109 pfu/mL。随机挑取24个克隆进行测序,获得有效序列22条,利用Blast2GO软件进行初步分析,其中18条序列具有不同数量的功能注释。综合表明,所构建的文库质量高,可用于筛选花发育重要功能基因,这为揭示烟草花发育机理和烟草遗传改良提供了物质基础。

关键词
烟草;花;SMART技术;cDNA文库
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《分子植物育种》网络版
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