研究报告/Research Report
葡萄广谱抗病毒RNAi载体构建及对合子胚起源的体细胞胚的遗传转化 
田莉莉* 
,
牛良 
,
牛良
中国农业科学院郑州果树研究所, 河南省果树瓜类生物学重点实验室, 农业部果树育种技术重点实验室, 郑州, 450009
作者 通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2016 年, 第 14卷, 第 7 篇 doi: 10.5376/mpb.cn.2016.14.0007
收稿日期: 2016年03月01日 接受日期: 2016年04月04日 发表日期: 2016年04月07日
作者 通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2016 年, 第 14卷, 第 7 篇 doi: 10.5376/mpb.cn.2016.14.0007
收稿日期: 2016年03月01日 接受日期: 2016年04月04日 发表日期: 2016年04月07日
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推荐引用：
引用格式(中文)：
田莉莉等, 2016, 葡萄广谱抗病毒RNAi载体构建及对合子胚起源的体细胞胚的遗传转化, 分子植物育种(online), 14(7): 1040-1048 (doi: 10.5376/mpb.cn.2016.14.0007)
引用格式(英文)：
Tian et al., 2016, Construction of Broad-spectrum Virus Resistant RNAi Vector of Vitis and Genetic Transformation to Zygotic Embryo-derived Somatic Embryos, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding), 14(7): 1040-1048 (doi: 10.5376/mpb.cn.2016.14.0007)
摘 要
病毒病对世界葡萄生产危害严重。为创制广谱抗病毒植物新材料，本研究采用RT-PCR分别克隆获得了葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶病毒、葡萄病毒A和葡萄病毒B的外壳蛋白基因保守片段，用重叠延伸PCR方法串联获得了825 bp的大片段“GV”，以此串联基因片段用作干扰片段，采用Gateway技术构建了同时含有4种病毒CP基因片段的RNAi植物表达载体“Ph12-GV”，冻融交替法将其转入农杆菌菌株EHA105中。采用根癌农杆菌介导法遗传转化“红宝石无核”葡萄合子胚诱导发生的体细胞胚，RT-PCR的检测结果显示，目的基因片段成功转入葡萄中并在RNA水平上得到表达。
关键词
葡萄； 抗病毒； RNAi载体； 体细胞胚；遗传转化
