王康¹ , 李恩杰¹ , 董洁² , 周禾¹

1 中国农业大学动物科技学院草业科学系, 北京, 100193
2 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京, 100193100081
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2010 年, 第 8卷, 第 7 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2010.08.0007
收稿日期: 2010年08月15日    接受日期: 2010年09月14日    发表日期: 2010年10月28日

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推荐引用：

王康等, 2010, 高羊茅RNA提取方法的比较研究, 分子植物育种 Vol.8 No.7 (doi: 10.5376/mpb.cn.2010.08.0007)

高羊茅（Festuca arundinacea Schreb.是一种重要的牧草和草坪兼用型草种，在国内外农牧业和草坪业中占据重要的地位。高质量 RNA 的提取是高羊茅分子生物学研究的必要前提。本实验以高羊茅叶片为材料，采用常用的2种方法对其总 RNA进行提取，同时对前人的 RNA 提取方法进行改良，寻求最佳的高羊茅总 RNA提取方法。通过比较发现， Trizol 法价格昂贵不适合大量植物组织提取，传统的异硫氰酸胍法所提取的总RNA 有蛋白质污染且 RNA 有所降解，改良后的异硫氰酸胍法所获得的总RNA 经琼脂糖凝胶电泳检测，可清晰的看到28S rRNA、18S rRNA 和 5S rRNA 3条带，且 28S rRNA 的亮度大于 18S rRNA 的亮度 ，OD₂₆₀/OD₂₈₀ 比值介于1.8~2.0之间，OD₂₆₀/OD₂₃₀比值大于2.0，表明该方法提取的 RNA 完整性好，纯度高。通过 cDNA-AFLP 分析方法的检测，可得到条带清晰、多态性丰富的图谱，说明该方法提取的总 RNA 可直接用于后续的分子生物学研究中，为进一步的高羊茅分子生物学研究打下良好基础。

高羊茅；总RNA提取；改进的异硫氰酸胍法