大青杨纤维素合酶(PuCesA7) cDNA的克隆及反义表达载体的构建  

许雷1 , 刘一星1 , 方连玉2
1东北林业大学生物质材料科学与技术教育部重点实验室, 哈尔滨, 150040
2东北林业大学林学院, 哈尔滨,150040
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2011 年, 第 9卷, 第 116 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0116
收稿日期: 2011年10月08日    接受日期: 2011年10月20日    发表日期: 2011年11月17日
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摘 要

本研究提取大青杨叶片总 RNA,经 RT-PCR 扩增得到约1.3 kb 的 cDNA 片段,将其克隆到 pMD18-T 载体。经测序,该片段长1 304 bp,与欧洲颤杨 PtrCesA7 全长 cDNA 序列比对,核苷酸相似性为97%。克隆到载体上的 PuCesA7 片段用 SacⅠKpnⅠ双酶切,反向插入到植物表达载体 pROKⅡ P35S 启动子和 Tnos 终止子之间,成功构建 pROKⅡ-P7 SacⅠKpnⅠ反义表达载体。利用该植物表达载体对大青杨的遗传转化正在进行中,以确定 PuCesA7 基因的初步功能。

关键词
大青杨;纤维素合酶;反义表达载体
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《分子植物育种》网络版
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