刁卫平 , 王述彬 , 刘金兵 , 潘宝贵 , 戈伟

江苏省农业科学院蔬菜研究所, 南京, 210014
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2012 年, 第 10卷, 第 2 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0002
收稿日期: 2011年12月31日    接受日期: 2012年01月10日    发表日期: 2012年01月18日

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推荐引用：

引用格式(中文)：
刁卫平等, 2012, 辣椒叶片原生质体分离及愈伤组织形成, 分子植物育种(online) Vol.10 No.2 pp.1012-1016 (doi: 10.5376/mpb. cn.2012.10.0002)
引用格式(英文)：
Diao et al., 2012, Protoplast Isolation from Pepper Leaves (Capsicum annuum L.) and Callus Formation, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol.10 No.2 pp.1012-1016 (doi: 10.5376/mpb.cn.2012.10.0002)

本文以辣椒细胞质雄性不育系21A叶片为试验材料，对原生质体分离过程中的若干因素如酶液组成、酶解时间、低温预处理、纯化时的离心转速及时间进行了比较分析，以探讨辣椒叶片原生质体分离的最佳条件。研究结果表明，辣椒叶片在4℃低温预处理12 h后，经酶液CPW+9%甘露醇+0.1%MSE+0.2%PVP +1.0%纤维素酶+0.5%离析酶+0.2%果胶酶在27℃，转速为50 r/min的摇床上酶解4 h后可获得大量原生质体。纯化时，适当提高离心转速的短时间离心有利于高产量原生质体的获得，以800 r/min离心8 min效果最好。纯化的原生质体稀释后培养在含6-BA的KM8P培养基上，48 h后可见第一次细胞分裂，1个月后可获得愈伤组织。

辣椒；原生质体；愈伤