曾拓^1,2,3 , 罗汝叶^2,3 , 巩鹏涛^1,2 , 赵德刚³ , 柳参奎¹

1. 东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心, 哈尔滨, 150040
2. 海南省农作物分子育种重点实验室, 海南省热带农业资源开发利用研究所, 三亚, 572025
3. 贵州大学生命科学院, 贵州省农业生物工程重点实验室, 贵阳, 550025
作者    通讯作者
豆科基因组学与遗传学, 2011 年, 第 2 卷, 第 7 篇   
收稿日期: 2011年05月24日    接受日期: 2011年06月21日

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推荐引用：

Zeng et al., 2011, Heterolous Expression，Purification and Batch Preparation of Alcohol Dehydrogenase from Lotus japonicus MG20 and GiFu and Analysis of Enzymatic Activities, Legume Genomics and Genetics, Vol.02 No.03 (doi: 10.5376/lgg.2011.02.0003)

本研究，我们利用RT-PCR技术从百脉根两个品系MG20及Gifu中分别克隆到LjADH1 (MG20)和LjADH1 (GiFu)基因，并将它们转入原核蛋白表达载体pQE30，通过纯化优化获得了可溶性的有活性融合蛋白， LjADH1 (MG20)的蛋白浓度达到1.12 mg/mL、而LjADH1 (GiFu)浓度为1.37 mg/mL，通过瓦勒和霍赫法测得融合蛋白酶活分别为48.2 U/mg 和52.6 U/mg，酶学分析发现Fe²⁺、Co²⁺及EDTA都对酶活有较强的抑制作用。

百脉根MG20；百脉根GiFu； 乙醇脱氢酶； 融合蛋白；纯化制备；酶活