关宁 , 王涌鑫 , 李聪 , 苗丽宏 , 张博

1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室, 北京, 100193; 2新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室, 北京, 100193; 2新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室, 北京, 100193; 2新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室, 北京, 100193; 2新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室, 北京, 100193; 2新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
作者    通讯作者
豆科基因组学与遗传学, 2010 年, 第 1卷, 第 4 篇   doi: 10.5376/lgg.cn.2010.01.0004
收稿日期: 2010年07月25日    接受日期: 2010年10月10日    发表日期: 2010年12月08日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

推荐引用：

Guan et al., 2009, Construction of Plant Expression Vectors for Sulphur-amino acid Gene and
Transformation to Lotus corniculatus L., Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 7(2): 257-263 (doi: 10.3969/mpb.007.000257) (关宁等, 2009, 含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化, 分子植物育种, 7(2): 257-263 (doi: 10.3969/mpb.007.000257))

用限制性内切酶NcoⅠ和BglⅡ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein上切下zeolin基因(约1 600 bp)和γ-zein基因(约720 bp)，将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上，构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein。采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404，利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatus L.)。经过共培养、筛选分化、再生，得到抗性植株。对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明，γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中，在核酸水平得到了表达。含硫氨基酸数据分析表明，转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P<0.01)，但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著。

含硫氨基酸基因；表达载体构建；百脉根；转化