2 山西农业大学农学院, 太谷, 030801
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豆科基因组学与遗传学, 2013 年, 第 4卷, 第 5 篇
收稿日期: 2016年09月18日 接受日期: 2016年09月18日 发表日期: 2013年09月18日
引用格式(中文):
郭彬, 侯思宇, 黄可盛, 路阳, 韩渊怀, 王玉国, 2013, 大豆总RNA提取方法比较及其在基因克隆和表达分析中的应用, 分子植物育种, 11(2): 255-261
引用格式(英文):
Guo B., Hou S.Y., Huang K.S., Lu Y., Han Y.H., and Wang Y.G., 2013, Different methods for extracting total RNA and their application in gene cloning and gene expression analysis in soybean (Glycine max), Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 11(2): 255-261
为确立大豆叶、花组织提取总RNA的最佳方法,比较了植物总RNA 提取试盒剂法、改良的CTAB-LiCL法和改良的热硼酸法的提取效果。通过RNA产量、纯度、凝胶电泳及后续的基因克隆和荧光定量PCR等分析,结果表明:热硼酸法所提取的叶、花总RNA含量约为其他两种方法的6倍;总RNA OD260/OD280值介于1.98~2.1;电泳条带完整清晰;应用获得的总RNA所克隆ZAT9-like基因,经测序获得885 bp的核酸序列与ZAT9-like (登录号: XM_003517371.1)基因同源率达99%;荧光定量分析Histone H3基因的扩增曲线与融解曲线峰型良好。说明该方法能够满足一般分子生物学下游实验的要求,是一种理想的针对大豆叶、花总RNA的的提取方法。