刘绵学 , 伏毅 , 王艳 , 谢艳 , 黄敏

四川省原子能研究院生物技术研究所, 辐照保藏四川省重点实验室, 成都, 601010
作者    通讯作者
豆科基因组学与遗传学, 2015 年, 第 6卷, 第 3 篇   
收稿日期: 2015年08月19日    接受日期: 2015年08月28日    发表日期: 2015年09月20日

本文首次发表在 《分子植物育种》(2015年第13卷第12期2713-2720页)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License,协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。

推荐引用：

引用格式(中文):

刘绵学, 伏毅, 王艳, 谢艳, 黄敏, 2015, Co 胁迫下紫花苜蓿 HPT 基因的表达调控研究, 分子植物育种, 13(12): 2713-2720 (doi: 10.13271/j.mpb.013.002713)

引用格式(英文):

Liu M.X., Fu Y., Wang Y., Xie Y., and Huang M., 2015, Study on HPT Gene Expression Regulation of Medicago sativa under Cobalt Stress, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(12): 2713-2720 (doi: 10.13271/j.mpb.013.002713)

钴(Co)胁迫会对植物产生多种毒害作用。为研究其植物毒性作用机理，需构建Co胁迫条件下紫花苜蓿的实时荧光定量 PCR 反应体系。研究选取了 6 个持家基因(actin2, GAPDH, UBI, 18S, MSC27, EF1-α)作为备选内参基因，以紫花苜蓿植株为实验材料，检测 Co 胁迫条件下备选内参基因的表达稳定性。通过 RefFinder 和 geNorm 软件分析，确定 Co 胁迫下紫花苜蓿最佳内参基因组合为 actin2 和 18S。将四种根际促 生菌分别接种紫花苜蓿，并使用 100 mg/L CoCl₂ 对接种后植株进行处理，使用筛选内参引物检测生育酚合成 关键基因尿黑酸叶绿醇转移酶(HPT)的转录水平。研究结果显示Co胁迫可使 HPT 基因转录水平发生显著下 调，根际促生菌铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 1401 可降低 Co 胁迫对苜蓿植株的毒害作用，接种该菌株植株的HPT基因相对表达水平为对照样本的6.63倍，植株株高和生物量分别达到对照样本的140.86% 和 193.62%。根据测试样本中 HPT 基因转录水平与植株 Co 耐受能力的变化趋势，推测紫花苜蓿的 Co 耐受 能力增强与生育酚的合成途径调控或存在紧密联系。

紫花苜蓿；内参基因筛选；钴胁迫；HPT基因