查中萍 , 万丙良 , 杜雪树

湖北省农业科学院粮食作物研究所, 湖北省粮食作物种质资源创新与遗传育种重点实验室, 武汉, 430064
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2013 年, 第 11卷, 第 16 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2013.11.0016
收稿日期: 2013年03月20日    接受日期: 2013年04月27日    发表日期: 2013年06月08日

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推荐引用：

引用格式(中文)：
查中萍等, 2013, Bt水稻T1C-19中外源基因的三引物多重PCR检测方法, 分子植物育种(online), 11(16): 1106-1113 (doi: 10.5376/mpb.cn.2013.11.0016)
引用格式(英文)：
Zha et al., 2013, A Tri-primer Multiplex PCR Method for the Exogenous Genes in Bt Rice T1C-19, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding), 11(16): 1106-1113 (doi: 10.5376/mpb.cn.2013.11.0016)

转cry1C基因水稻T1C-19是一个优良的抗螟虫水稻育种资源。本研究目的在于研发一种用于检测T1C-19及其衍生材料中外源基因的三引物多重PCR (polymerase chain reaction, PCR)检测方法。根据T1C-19中插入的外源基因序列和插入位点左右旁侧水稻基因组序列设计了3个PCR引物C1、C2和C3，并对多重PCR体系进行了优化。结果表明，0.5 μL 10 μmol/L C1+0.4 μL 10 μmol/L C2+0.2 μL 10 μmol/L C3的多重PCR体系可以准确区分cry1C基因纯合、杂合和阴性三种基因型，纯合体和阴性材料中均只扩增出一条DNA片段，纯合体中的片段大小为512 bp，而阴性材料中的片段大小为386 bp，杂合体中则同时扩增出这两条片段。该体系的建立为利用T1C-19进行抗螟虫水稻育种提供了一个简便有效的基因鉴定技术。

转基因水稻；多重PCR；共显性标记；cry1C；T1C-19