研究报告/Research Report
玉米转基因成分三重实时荧光PCR筛选检测 
王凤军 
,
陈强 
,
许海峰
,
陈强 ,
许海峰
浙江经贸职业技术学院应用工程系, 杭州, 310018
作者 通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2021 年, 第 19卷, 第 13 篇
收稿日期: 2021年03月08日 接受日期: 2021年03月12日 发表日期: 2021年03月14日
作者 通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2021 年, 第 19卷, 第 13 篇
收稿日期: 2021年03月08日 接受日期: 2021年03月12日 发表日期: 2021年03月14日
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本文首次发表在 《分子植物育种》(ISSN1672-416X，CN46-1068/S)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License,协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。
推荐引用：
王凤军, 陈强, 许海峰, 2021, 玉米转基因成分三重实时荧光PCR 筛选检测, 分子植物育种(网络版), 19(13): 1-8 (doi:10.5376/mpb.cn.2021.19.0013) (Wang F.J., Chen Q., and Xu H.F., 2021, Triple real-time fluorescent PCR screening of transgenic components in maize,, Fengzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding (online)), 19(13): 1-8 (doi: 10.5376/mpb.cn.2021.19.0013))
摘 要
本文开发建立了三重实时荧光PCR反应体系对玉米及其加工制品的转基因成分进行高通量快速检测。以玉米单拷贝内源基因adh1 (编码乙醇脱氢酶的基因)和启动子(35S promoter from cauliflower mosaic virus, p-35S)和t-NOS终止子(terminator of nopaline synthase gene from Agrobacterium tumefaciens, t-NOS)等常用转基因元件为靶标基因，以转基因玉米MON863、NK603、MON810、Bt11，非转基因玉米粉2019054以及转基因大豆粉，棉花籽和小麦粉等非玉米农作物样本等8份测试样品进行方法特异性分析，对10个玉米品系种子样本和41份玉米食品样品进行方法适用性分析和日常样本筛查检测，用标准曲线法验证方法的检测低限和重复性。结果表明该体系能在转基因阳性样本DNA为模板的一个反应管中同时检出3个靶标基因，在非转基因的玉米样本中仅检出内源基因，检测结果符合标示值；adh1，p-35S和t-NOS三种靶标基因扩增效率分别为96.84%，94.92%和93.80%，线性相关系数分别为0.999，0.990和0.997，检测低限为10个拷贝。该方法的建立可用于玉米等同源产品的出入境检测以及市场流通的符合性筛查检测。
关键词
三重实时荧光PCR；玉米；转基因成分；筛查检测
