美国白蜡SRAP-PCR反应体系的建立与优化  

陈罡 , 叶景丰 , 马冬菁 , 王骞春 , 范俊岗 , 潘文利
辽宁省林业科学研究院, 林木生物技术与分析测试中心, 沈阳, 110032
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2011 年, 第 9卷, 第 74 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0074
收稿日期: 2011年03月10日    接受日期: 2011年05月25日    发表日期: 2011年06月15日
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陈罡等, 2011, 美国白蜡SRAP-PCR反应体系的建立与优化, 分子植物育种 Vol.9 No.74 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0074)

摘 要

本研究利用正交试验设计L16 (45)对美国白蜡SRAP-PCR反应体系的五个因素(Mg2+, dNTP, 引物, Taq DNA聚合酶和模板DNA)在四个水平上进行优化试验,结果表明,Mg2+浓度对反应体系的影响最大;建立的美国白蜡SRAP-PCR最佳体系(25 μL)为:Mg2+ 2.5 mmol/L、Taq DNA聚合酶 0.5 U、dNTPs 0.25 mmol/L、引物 0.4 μmol/L、模板DNA 40 ng/μL。利用优化后的反应体系对4个美国白蜡材料进行了种间多态性检测,结果表明,该体系能够很好的满足美国白蜡基因组SRAP扩增的要求。这一优化体系的建立为今后利用SRAP标记技术对美国白蜡进行分子遗传研究提供基础。

关键词
美国白蜡;SRAP;正交设计;体系优化
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