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地方稻月亮谷花期控制基因
Hd3a
、
Hd1
、
Edh1
和
Ghd7
的多态性分析
水稻抽穗期控制的关键基因已基本清楚,但是栽培稻花期多样性的分子机理仍然不清楚。本文利用重测序月亮谷的全基因组序列、Takahashi等(2009)在PNAS上发表的部分数据和Xue等(2008)在Nature genetics发表的部分数据,研究了 Hd3a 、 Hd1 、 Edh1 和 Ghd7 等4个基因的核苷酸多态性。结果显示,月亮谷 Hd3a ... (2012年05月23日)
适于云南小麦断穗和抗条锈病引物SSR-PCR反应的体系优化
为开展云南小麦( Triticum aestivum ssp yunnanense King)断穗、抗条锈病基因的分子辅助标记鉴定,选择其新鲜幼嫩的无病斑叶为材料,研究了PCR反应体系中Mg 2+ 、dNTP、模板DNA、引物和Taq酶的浓度对其断穗、抗条锈病SSR引物扩增结果的影响,构建起了适宜其断穗、抗条锈病基因分子标记的最佳PCR反应体系,该体... (2012年06月12日)
浸花转化技术中不结球白菜与拟南芥的比较研究
为了探索建立白菜的浸花转化技术,并阐释其转化率低的原因,本研究以拟南芥为对照,平行开展了二者的浸花转化研究。处理植株收获种子采用含0.225 g/Lppt的Basta溶液喷施,拟南芥中获得了抗性株,其植株转化率为20%,白菜中没有获得抗性株。GUS检测进一步证明了拟南芥抗性株中外源基因的表达。以浸花处理后的拟南芥和白菜为材料,采用细菌平板培养的方法比较... (2012年05月15日)
植物病原胞外分泌型真菌无毒基因研究进展
植物真菌性病害是世界范围内影响农作物生产的最主要病害。分子生物学与生物信息学技术的飞速发展,不仅极大地促进了植物抗病基因的鉴定,也为病原菌无毒基因的克隆及其功能验证提供了保障。尤其,番茄叶霉菌、油菜茎基溃疡病菌及稻瘟病菌等胞外分泌型真菌无毒基因的克隆,有助于阐明病原菌与寄主植物之间的作用机理,为植物病害的综合防治创造了条件。本文对植物胞外分泌型真菌无毒... (2012年04月28日)
SRAP分子标记在大豆抗豆卷叶螟研究中的应用
相关序列扩增多态性(SRAP)是一种新型的分子标记,该标记操作简便,具有高度共显性,在基因组中分布均匀,便于克隆测序目标片段,可用于基因定位,基因克隆,遗传图谱构建等。SRAP分子标记能成功应用到大豆作物研究中前提,必需要建立起一个优良稳定有效的SRAP-PCR反应体系,以便确定SRAP标记结果是有效可信的。本研究建立一个有效稳定优良的SRAP-PCR... (2012年04月30日)
菊芋SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选
本研究以菊芋为材料,通过单因子优化试验和L 16 (4 5 )正交试验设计对影响SRAP-PCR扩增结果的重要参数进行探讨,建立了适合菊芋SRAP-PCR分析的反应体系,即20 μL反应体系中含10×PCR 扩增缓冲液,2.5 mmol/L Mg 2+ ,0.24 mmol/L dNTPs,0.25 μmol/L正反引物,0.8... (2012年04月23日)
苍山奇蝶捧瓣蝶化MADS基因筛选
为了克隆兰花捧瓣蝶化的相关基因,揭示蝶化形成的分子机理,本试验用总RNA提取试剂盒提取‘苍山奇蝶’蝶化捧瓣、正格花捧瓣的总RNA,经mRNA纯化试剂盒纯化后,采用Smart技术逆转录成cDNA,经RsaI酶切后,以蝶化捧瓣酶切cDNA作为检测子,正格花酶切cDNA作为驱赶子,成功构建了‘苍山奇蝶’蝶化捧瓣... (2012年03月19日)
植物雌配子体发育的分子机理与基因调控
植物雌配子体发育是被子植物生长发育的一个重要过程,其涉及孢原细胞形成与分化、生殖细胞的减数分裂、功能大孢子的形成、胚囊细胞核分裂以及胚囊的形成等过程。通过对拟南芥、水稻等植物的研究,人们获得众多的雌配子体发育异常的突变体,通过细胞学和分子遗传研究,了解了植物雌配子体发育过程的某些重要特征,并且克隆了许多相关的基因。本文较全面地阐述了参与植物雌配子体... (2012年03月19日)
dbMarker:基于云计算的分子标记管理系统
为了方便研究人员管理海量增长的分子标记信息数据,本研究采用Google App Engine云计算平台开发了dbMarker分子标记管理系统。利用该系统可以通过引物名称、前后引物序列等基本信息查询相关引物,同时还可对退火温度、扩增长度、引物所在染色体等设置查询条件检索符合用户要求的引物。此外,该系统还具备完善的数据上传更新功能,能够实现标记信息的安全稳... (2012年04月26日)
小麦微核心种质Glu-B3位点低分子量麦谷蛋白亚基等位基因的PCR检测
低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)对普通小麦的加工品质有重要影响。本试验对中国小麦微核心种质中285份小麦品种采用10对Glu-B3位点特异性引物进行了Glu-B3位点的9个低分子量麦谷蛋白亚基等位基因类型的PCR检测,结果确定了284份品种各自的Glu-B3位点等位基因类型,另外1份品种为新的未知等位基因类型。其中c等位基因的品种数目最多,占总品种... (2011年06月27日)
大白菜桔红心基因or的SSR标记定位
大白菜桔红心(or)性状为一种重要的品质性状,本研究利用设计的近440对SSR引物,以600株Chiifu×07A163的F 2 代分离群体为试材,寻找与大白菜桔红心基因紧密连锁的分子标记。在大白菜结球期,对F 2 代分离群体剖球调查性状,验证了桔红心性状为一对隐性基因控制的简单遗传。通过构建桔红心基因池进行BSA分析,最终得到3个与目标基... (2011年05月06日)
Bt
Cry1Ac22杀虫蛋白在酿酒酵母中表达和亚细胞定位
为了弄清 Bt Cry1Ac22杀虫晶体蛋白在真核中的表达与亚细胞定位,我们以载体pYES2为基础,将 cry1Ac22 杀虫基因和绿色荧光蛋白 GFP 基因融合,构建含Cry1Ac22毒蛋白和绿色荧光蛋白(GFP)的真核表达载体pYES2-Cry1Ac22-GFP。该融合基因以酵母GAL1启动子启动,经20%半乳糖大量诱导Cry1Ac22-GFP融... (2011年05月05日)
苏云金芽孢杆菌Cry1Ac22杀虫晶体蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化
用PCR技术从苏云金芽孢杆菌W015-1菌株中克隆了 cry1Ac22 基因,将该基因连接到pQE30原核表达载体上,构建了重组表达质粒pQE30-Cry1Ac22,并转化 E. coli M15宿主菌。用IPTG诱导表达出了His-tag-Cry1Ac22融合蛋白。不同的IPTG浓度和培养温度的比较实验,获得了最佳诱导表达条件为:1 mmol/L ... (2011年04月27日)
果蔗体细胞胚发育与组织渗透压比关系研究
以果蔗(Badila)尾梢心叶近生长点部位0~3 cm为外植体,以MS培养基为基本培养基诱导愈伤组织、并在体细胞胚发育的不同阶段采取样品,运用石蜡切片显微技术,结合愈伤组织的渗透势,研究胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织形态、体细胞胚的发育类型以及与渗透压比之间的关系。结果表明:不同时期和类型的愈伤组织在细胞形态结构上存在较大差异,胚性愈伤组织呈浅黄色、细胞... (2011年04月29日)
植原体膜蛋白及其研究进展
植原体是一类危害严重的植物病害,由于其难以体外培养,因此其致病机制尚不完全清楚。由于其无细胞壁,细胞膜蛋白在其致病过程应该发挥了重要作用。本文对植原体膜蛋白的分类及结构进行了初步的总结,重点介绍了植原体的免疫膜蛋白和Sec膜蛋白种类、结构及研究进展,并进一步展望了上述膜蛋白在检测植原体的应用前景。 (2011年04月28日)
SRAP和RGA标记技术在甘薯的抗茎线虫病遗传多样性中的应用
为了评价甘薯种质的抗茎线虫病遗传多样性,选用SRAP和RGA分子标记方法,SRAP和RGA引物设计如下:利用Blast软件,对Genbank数据库中由王钰等克隆的342个甘薯RGA(编号为DQ903322-DQ903664)与抗线虫病基因( RGC1 、RX )进行比对,筛选出与抗病基因同源性高于50%的RGA序列11个,以高抗甘薯茎线虫病品种徐78... (2011年04月15日)
转
il-4
基因大白菜(
Brassica Pekinensis
Rupr.)分子检测及遗传和表达研究
以花粉管通道法转化得到的转 il-4 基因大白菜哈白二号、潍白六号和新世纪三个品种为试验材料,通过PPT抗性筛选、PCR扩增、PCR-Southern杂交和Western杂交等技术,对转 il-4 基因大白菜后代进行分子检测,并研究了 il-4 基因在T 6 代自交大白菜中的传递规律及对T 6 代植株表型、抗病性进行了调查。经检测共得到22个株系的63... (2011年04月12日)
烟草优质品种花全长cDNA文库的构建和质量鉴定
以优质烤烟品种翠碧一号花为材料,CTAB法提取总RNA,按经修改的Creator TM SMART TM cDNA Library Construction kit的方法,成功构建了花全长cDNA文库。经鉴定,初级文库库容为4.05×10 6 个克隆,重组率达到95%,插入片段集中在1 000bp~2 500 bp之间,平均长度约为1 ... (2011年04月08日)
23份烟草品种遗传关系的SSR分析
本研究利用SSR标记分析了23份烟草品种的遗传关系。以8个烟草品种为材料从1 998对SSR引物中筛选出700对有稳定多态的引物,在23个烟草品种中检测出1 600个等位基因,平均每对引物检测的等位基因数为2.29个。23个烟草品种间遗传相似系数(GS)的变化范围为0.65~0.98、平均为0.79,其中烤烟品种间遗传相似系数在0.77~0.98之间、... (2011年04月08日)
不依赖于连接反应克隆(LIC)的技术进展
不依赖于连接反应的高效克隆方法(ligation–independent cloning, LIC)是以同源重组的基本原理,利用T4 DNA聚合酶的3′-5′外切酶活性在待插入片段以及线性载体的末端产生单链突出,通过同源序列在体外完成交换重组,达到基因克隆目的。本文在总结国内外不依赖于连接反应克隆(LIC)研究的基础... (2011年04月02日)
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